인산완충생리식염수

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인산완충생리식염수 (Phosphate-buffered saline, PBS)는 생물학적 연구에 일반적으로 사용되는 완충 용액이다. 이는 인산 수소이 나트륨 , 염화나트륨 및 일부 제제에서는 염화칼륨 및 인산이수소 칼륨을 함유하는 수용성 염 용액이다 . 완충액은 pH를 일정하게 유지하는데 도움이 된다. 용액의 삼투압과 이온농도는 인체의 삼투압 및 이온 농도와 일치한다(등장성).

응용편집

PBS는 대부분의 세포에 등장성 및 무독성이기 때문에 용도가 많다. 이러한 용도에는 물질 희석 및 세포용 용기 세정이 포함된다. EDTA를 함유한 PBS는 또한 부착되고 응집 된 세포를 분리시키는데 사용된다. 그러나 아연과 같은 2가 금속은 침전을 초래할 수 있기 때문에 첨가 할 수 없다. 이러한 형태에는 굳완충액(Good's buffer)이 권장된다.

조제편집

PBS 용액을 제조하는 방법에는 여러 가지가있다. 이 중 하나는 둘베코PBS(DPBS)로, 표준 PBS보다 인산염 농도가 낮다[1]. 일부 제형은 칼륨 및 마그네슘을 함유하지 않지만 다른 제형은 칼슘 및(또는) 마그네슘을 함유한다.[2]

가장 일반적인 PBS (1X)
농도 (mmol / L) 농도 (g / L)
   NaCl    137 8.0
   KCl    2.7 0.2
   Na2HPO4    10 1.44
   KH2PO4   1.8 0.24

800 mL의 증류수로 시작하여 모든 염분을 용해시킨다. HCl로 pH를 7.4로 조절한다. 총 1리터가 되도록 증류수를 첨가한다. 최종 1x PBS는 10mM PO43- , 137mM NaCl 및 2.7mM KCl의 염분을 가진다.

콜드 스프링 하버 프로토콜(Cold Spring Harbor Protocol)[3]
시약 MW 질량 (g) 10X [M] 10 배 질량 (g) 5X [M] 5 배 질량 (g) 1X [M] 1X
Na2HPO4 141.95897 14.1960 0.1000 7.0980 0.0500 1.41960 0.0100
KH2PO4 136.08569 2.4496 0.0180 1.2248 0.0090 0.24496 0.0018
NaCl 58.44300 80.0669 1.3700 40.0335 0.6850 8.00669 0.1370
KCl 74.55150 2.0129 0.0270 1.0064 0.0135 0.20129 0.0027
pH = 7.4

PBS의 pH는 ~ 7.4이다. 완충 용액을 만들 때 항상 pH미터를 사용하여 pH를 직접 측정하는 것이 좋다. 필요한 경우 염산 또는 수산화 나트륨을 사용하여 pH를 조정할 수 있다.

PBS는 또한 상업적으로 제조된 PBS 완충제 정제(tablet) 또는 파우치(pouch)를 사용해 제조 할 수 있다.[4]

세포 배양에 사용되는 경우, 용액은 분액(aliquots)으로 분배되고 고압 증기 멸균 또는 여과에 의해 멸균 할 수있다. 사용하는 경우에 따라 멸균이 필요하지 않을 수도 있다. PBS는 실온 또는 냉장으로 저장할 수 있다. 그러나, 농축액은 저온에 보관할 시 침전할 수 있으므로, 실온에 보관하여 사용전에 완전히 녹여야 한다.

참고편집

  • 붕산염 완충 식염수
  • 트리스 완충 식염수

참고 문헌편집

외부 링크편집